非衍生化-气相色谱-串联质谱法测定植物油中5 种植物甾醇

摘要:

目的 基于脂肪酶对脂肪的酶解作用, 构建了一种室温皂化的前处理方式, 将植物油中结合态的甾醇酯高效游离出来, 利用气相色谱-串联质谱法(gas chromatography-tandem mass spectrometry, GC-MS/MS)建立植物油中的菜籽甾醇、β-谷甾醇、芸薹甾醇、豆甾醇、环阿屯醇 5 种甾醇的检测方法。方法 植物油经脂肪酶酶解、碳酸钾-乙醇溶液皂化后将甾醇游离出来, 利用正己烷萃取, 采用 HP-5MS 毛细管色谱柱(30 m×0.25 mm, 0.25 μm)分离, GC-MS/MS 多反应监测(multiple reaction monitoring, MRM)模式进行检测,外标法定量。结果 在弱极性色谱柱 HP-5MS 上 5 种甾醇色谱行为良好; 缓冲溶液 pH 为 9.0、脂肪酶用量为0.05 g、酶解 20 min 时酶解效果最好, 室温条件进行皂化, 正己烷作为萃取溶剂, β-谷甾醇及其他 4 种甾醇的线 性 范 围 分 别 为 0.05~50.00 mg/L 和 0.05~20.00 mg/L, 相 关 系 数 均 大 于 0.999, 方 法 的 加 标 回 收 率 在84.7%~101.6%之间, 相对标准偏差为 1.4%~4.1%, 5 种甾醇的检出限为 3.0 mg/kg, 定量限为 10.0 mg/kg。结论 本研究开发的方法简便快速, 便于植物油中甾醇的快速测定。

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