稳定同位素稀释-超高效液相色谱-三重四极杆质谱法测定牛奶及牛源性婴幼儿配方乳粉中A1 型和A2 型β-酪蛋白含量

摘要:

目的 建立基于纯化蛋白和稳定同位素稀释-超高效液相色谱-三重四极杆质谱法(ultra performance liquid chromatography coupled triple quadrupole mass spectrometry, UPLC-MS/MS)定性及定量测定牛奶及牛源性婴幼儿配方乳粉中 A1 和 A2 β-酪蛋白变异体的分析方法。方法 首先将 β-酪蛋白标准品中 A1 和 A2 β-酪蛋白变异体在高效液相色谱仪上分离, 通过各自的纯化蛋白确定两种变异体在标准品中的含量, 再将试样中的 β-酪蛋白经胰蛋白酶酶解成肽, 经 UPLC-MS/MS 检测。通过筛选的特异肽段, 经 β-酪蛋白标准品及稳定同位素稀释内标法计算, 获得试样中 β-酪蛋白 A1 变异体和 A2 变异体的含量。 结果 本研究采用的 β-酪蛋白标准对照品中 A1 和 A2 β-酪蛋白变异体含量分别为 20.8%和 55.1%, 且在检测中标准曲线的线性相关系数均大于 0.99, 方法重现性中相对标准偏差为 2.290%~4.720%。 结论 本方法溯源性及精密度好, 适用于牛奶及牛源性婴幼儿配方乳粉中两种 β-酪蛋白变异体的测定。

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