免疫亲和柱结合超高效液相色谱-串联质谱法测定牛奶中的16 种真菌毒素比较研究

摘要:

目的 通过比较 5 种不同商品化多合一免疫亲和柱的可检测目标毒素种类、回收率和稳定性, 筛选性 能 最 优 的 免 疫 亲 和 柱 , 建 立 免 疫 亲 和 前 处 理-超 高 效 液 相 色 谱-串 联 质 谱 法 (ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, UPLC-MS/MS)测定牛奶中 16 种真菌毒的方法。方法 牛奶样品分别经 5 种不同多毒素免疫亲和柱进行净化富集, 用优化后的 UPLC-MS/MS, 在多反应监测模式下测定, 同位素内标法定量, 筛选覆盖牛奶中真菌毒素污染种类全面、 回收率和稳定性最佳的免疫亲和柱, 并进行免疫亲和柱性能评价和方法学验证, 最终将方法应用于实际样品检测。 结果 免疫亲和柱 A 对牛奶中 16 种真菌毒素在低、中、高 3 个添加水平均具有良好的准确度和精密度, 加标回收率在 83.6%~126.8%之间, 相对标准偏差为0.2%~18.4%。柱 A 内各毒素残留水平低于仪器检出限, 柱容量在 21.8~1317.5 ng 之间。使用免疫亲和柱 A 富集净化样品, 各目标毒素在线性范围内线性良好, 相关系数均大于 0.99, 定量限为 0.0010~0.2000ng/g。应用该方法对牛奶质控样品和实际样品进行检测, 质控样品测定值均在标示范围内; 实际样品中能够检出较低水平的黄曲霉毒素 M1、去环氧脱氧雪腐镰刀菌烯醇和伏马毒素 B1。结论 本研究验证筛选免疫亲和柱 A 应用于牛奶中 16 种真菌毒素的测定, 其柱残留和柱容量能够满足牛奶中真菌毒素污染的测定; 经方法学验证该方法准确可靠、灵敏度高, 适用于牛奶中 16 种真菌毒素的日常检测。

Abstract: