基于特征肽段结合超高效液相色谱-串联质谱法的乳制品真实性鉴别方法研究

摘要:

目的 基于超 高 效 液 相 色 谱-串 联 质 谱 法 (ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, UPLC-MS/MS)建立乳制品中乳铁蛋白、乳桥蛋白、奶牛 A1 β-酪蛋白和 A2 β-酪蛋白、水牛 A2 β-酪蛋白的检测方法, 开展市售乳制品中功能性蛋白质检测和乳制品真实性鉴评分析。 方法 乳蛋 白 经 酶 解 后 , 应 用 超 高 效 液 相 色 谱- 四 极 杆- 静 电 场 轨 道 阱 高 分 辨 质 谱 法 (ultra performance liquid chromatography-triple quadrupole-Orbitrap high resolution mass spectrometry, UPLC-Q/Orbitrap HRMS)和UPLC-MS/MS 筛选获得可用于定性定量分析的特征肽段, 基于 UPLC-MS/MS 建立同时检测LF、LPN、奶牛 A1 β-CN、奶牛 A2 β-CN 和水牛 A2 β-CN 的方法并应用于乳制品检测。结果 5 种待测蛋白在相应的浓度范围内线性关系良好(r2>0.99), 加标回收率在 82.1%~105.5%之间, 相对标准偏差均小于 5%, 78 份乳制品的检测结果表明同类样品 LF 含量差异较大, 不同类液体乳中 LPN 均值差异不大。结论 本方法性能良好,适用于乳制品中乳桥蛋白等功能性蛋白的同时检测, 也可以实现乳制品中乳蛋白物种来源的鉴别。

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