高效液相色谱法检测牛奶中免疫球蛋白 G 含量

摘要:

目的 建立高效液相色谱法检测牛奶中免疫球蛋白 G 含量的分析方法。方法 样品加 pH 为 7.0 的磷酸盐缓冲液提取, 于 12000 r/min 下离心 10 min, 经玻璃纤维滤纸过滤, 取滤液用 1 mL 规格的 Protein G 亲 和柱净化, 用 4 mL pH 为 2.5 的洗脱液定容, 过滤膜, 以 BEH C4 为色谱柱, 柱温 65℃, 以三氟乙酸水溶液、三氟乙酸乙腈溶液为流动相, 流速设置为 1.5 mL/min, 进样量 30 μL, 在波长为 280 nm 下用高效液相色谱仪进行测定。结果 免疫球蛋白 G 质量浓度在 5.0~200.0 mg/L 范围内线性关系良好, 相关系数 r2 大于 0.999,方法定量限(limits of quantification, LOQs)为 10.0 mg/kg。当加标浓度在 100.0~400.0 mg/kg 范围内, 加标回收率在 97.2%~103.6%之间, 相对标准偏差在 2.5%~5.9%之间。结论 依据化学分析方法验证指南(GB/T 27417—2017《合格评定 化学分析方法确认和验证指南》), 确认所建立的分析方法具有足够的准确性和重复性。该方法可为准确检测牛奶中免疫球蛋白 G 含量提供技术支持。

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