高效液相色谱法检测奶及奶制品中未变性乳铁蛋白

摘要:

目的 建立一种基于高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)测定奶及奶制品中未变性乳铁蛋白的分析方法。方法 本研究探索了奶及奶制品前处理方法、分析未变性乳铁蛋白的方法的液相色谱条件、检出限、定量性、线性范围、重复性、再现性等关键参数。结果 利用磷酸盐缓冲液对样品进行稀释, 用 1 mL 规格的 HiTrapTM Heparin HP 肝素亲和柱进行富集和纯化为简单有效的前处理方法, 分析未变性乳铁蛋白的液相色谱条件为: XBridge Protein BEH C4 色谱柱(4.6 mm×250 mm, 3.5 μm), 柱温 60℃。针对液态奶样品, 本方法的检出限为 2.5 mg/kg、定量限为 5.0 mg/kg, 回收率为 106.0%~107.5%; 针对乳粉样品, 本方法的检出限为 5.0 mg/kg、定量限为 10.0 mg/kg, 回收率为 103.5%~107.7%。奶及奶制品中未变性乳铁蛋白的定量上限为 100 mg/kg, 在线性范围内具有良好的线性关系(r2>0.999)。平行性实验、日间实验、日内实验和实验室间比对实验表明, 本方法具有良好的重复性和再现性。 结论 本方法前处理简单、检测速度快, 可以实现对不同类型奶及奶制品中未变性乳铁蛋白的定量分析, 可为企业和质检机构评价奶及奶制品品质提供标准。

Abstract: