液相色谱-串联质谱法测定花椒中的 6 种山椒素及其产地鉴别

摘要:

目的 建立液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography tandem mass spectrometry, LC-MS/MS)快速测定花椒中 6 种山椒素的方法, 并进行产地分析。方法 样品通过甲醇超声提取, LC-MS/MS 外标法测定, 对 提取方式、仪器条件进行了优化, 与高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)检测进行比较, 对方法正确度、精密度、检出限和定量限进行了验证。利用该方法对不同产地的 10 个青花椒、33 个红花椒进行测定, 通过聚类分析、主成分分析(principal component analysis, PCA)进行产地分析鉴别。 结果 6 种山椒素在 LC-MS/MS 上分离良好, 在 0.10~5.00 μg/mL 范围内线性关系良好, 相关系数(r2)≥0.996, 检出限为0.10×10–3~0.18×10–3 mg/g, 定量限为 0.33×10–3~0.61×10–3 mg/g; 在低、中、高 3 个水平下 6 种山椒素的平均回收率在 86.67%~100.67%之间, 相对标准偏差为 0.72%~9.11%, 正确度和精密度均符合方法验证要求, 检出限、定量限均低于 HPLC 方法, 灵敏度、准确度更高。通过对不同产地花椒的检测结果显示, 羟基-α-山椒素为含量最高的麻味物质, 且两类花椒测定结果均表现出汉源花椒中 6 种山椒素总量高于其他产地花椒的特点。通过聚类分析、PCA 分析表明, 汉源青花椒中羟基-β-山椒素, 红花椒中羟基-α-山椒素、羟基-γ-山椒素、γ-山椒素含量均高于所测其他产地同种花椒中麻味物质含量, 是区别于其他产地花椒的主要麻味物质。结论 该方法前处理简单, 灵敏度、准确度高, 可用于花椒中 6 种山椒素的检测, 且通过对花椒中 6 种山椒素的检测及聚类、PCA 分析能有效区分汉源花椒与其他产地花椒, 为鉴别真假汉源花椒提供了可靠的方法。

Abstract: