高效液相色谱法同时测定烟酰胺单核苷酸中 5 种有关物质

摘要:

目的 构建同时检测烟酰胺单核苷酸(nicotinamide mononucleotide, NMN)中 5 种有关物质[烟酰胺氧化物、三磷酸腺苷(adenosine triphosphate, ATP)、二磷酸腺苷(adenosine diphosphate, ADP)、一磷酸腺苷(adenosine monophosphate, AMP)及烟酰胺]含量的高效液相色谱法。 方法 采用 C18 色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm), 以 50 mmol/L 磷酸二氢钾缓冲盐溶液(用磷酸调节 pH 为 4.5)-甲醇为流动相进行梯度洗脱, 流速为1 mL/min, 进样量为 20 μL, 检测波长 210 nm, 柱温 20℃, 试样盘控温: 5℃, 并对方法的专属性、灵敏性、准确性、重复性、耐用性及适用性进行验证。结果 烟酰胺氧化物、ATP、ADP、AMP 及烟酰胺分别在质量浓度 0.4060~16.2402、0.4110~16.4403、0.4150~16.6010、0.4163~16.6507、0.4028~16.1206 μg/mL 范围内, 质量浓度与峰面积呈现良好的线性关系, 线性系数 r2 值均大于 0.998; 加标回收率范围分别为 98.5%~102.6%、95.6%~104.1%、98.9%~104.6%、100.0%~102.8%、100.6%~101.3%; 3 批样品中 5 种杂质含量检测结果分别为0.18%、0.20%、0.16%、0.14%、0.26%; 5 种杂质的检出限范围为 0.04028~0.04163 μg/mL, 定量限范围为0.4028~0.4163 μg/mL, 灵敏度高; 专属性、重复性和耐用性均良好。结论 该方法简便易行、适用性广, 适用于 NMN 中 5 种有关物质的检测, 为提升其质量标准奠定基础, 为食品安全提供保障。

Abstract: